1、验证目的：
通过对培养基的灵敏度验证来增加无菌检查的可信度。
2、原理：
不同种培养基内加入符合其生长条件的已知菌株做生长实验，根据加入定量细菌的生长情况来评价该培养基的灵敏度，菌量越少说明培养基灵敏度越高。
3、仪器设备：
阳性对照室（操作间净化级别小于10000级，局部净化小于100级，室温18-26℃，相对湿度40-60%）、恒温培养箱（30-35℃）、高压灭菌器、干烤箱（250℃）、显微镜等。
培养基：需氧菌、厌氧菌培养基（硫乙醇酸盐培养基）真菌培养基（改良马丁培养基）
测试菌种：金黄色葡萄球菌、枯草杆菌、白色念珠菌、生孢梭菌
4、验证实施
4.1、培养基配制：
分别称取硫乙醇酸盐培养基7.5g，改良马丁培养基7.0g，分别加250ml蒸馏水热溶解，
分装10ml/管、高压灭菌116℃,20min。
4.2、测试菌的培养：
在无菌操作台内，分别取金黄色葡萄球菌、枯草杆菌、生孢梭菌菌液少量，接种在硫
乙醇酸盐流体培养基（10ml/管）中，在30-35℃培养24小时：取白色念珠菌菌液少量，
接种在改良马丁培养基中在20-25℃培养24h。此时的培养液成为原菌液。
4.3.测试菌计数：
采用原菌培养液直接稀释、计数板计数法：
（1）分别取已经培养好的原菌液1ml，用生理盐水稀释10倍。
（2）用一片干净的盖玻片盖在一干净计数板上。
（3）吸少量含菌培养液接触盖玻片的边缘。
（4）在显微镜400倍下观察，并且按一小方块所见的每一个细菌大约相当于2*107细菌
/ml计算细菌浓度。
4.4原菌液稀释：
将上述原菌液根据细菌计数结果，分别用生理盐水稀释至10-100个菌/ml。
4.5灵敏度实验：
分别将（4）稀释菌液接种到（1）配制的10ml/管培养基中，每种菌液接
种3管培养基，以未接种的培养基为阴性对照，按规定的条件培养5天并逐日记录。
4.6结果判断：
以每种菌液接种的培养基不得少于2管呈阳性，即该培养基灵敏度符合要求。