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食品中黄曲霉毒素B1的检测方法与仪器配置

2016/4/7 11:52:52      来宝商城

     

    黄曲霉毒素B1(AFB1)主要是由黄曲霉、寄生曲霉和特曲霉产生的,是真菌的次级代谢物,是天然食物中最为多见的一种真菌毒素,主要污染花生、玉米、稻谷、小麦、花生油等粮油食品。黄曲霉毒素B1是已知的化学物质中致癌性最强的一种,对人和动物具有极强的毒性和致癌性,其毒性作用主要是对肝脏的损害。因此,国家质检总局规定黄曲霉毒素B1是大部分食品的必检项目之一。

食品中黄曲霉毒素B1的检测方法主要有酶联免疫吸附法(ELISA)、高效液相色谱法(HPLC)、薄层色谱法(TLC)等,其检测原理以及仪器配置如下:


一、酶联免疫吸附法(ELISA)

(1)适用范围:

粮食、花生及其制品、薯类、豆类、发酵食品及酒类等各种食品中黄曲霉毒素B1 的测定。

(2)实验原理:

试样中的黄曲霉毒素 B1经提取、脱脂、浓缩后与定量特异性抗体反应, 多余的游离抗体则与酶标板内的包被抗原结合, 加人酶标记物和底物后显色, 与标准比较测定含量 。

(3)实验仪器配置:


           仪器                   用途
           天平              用于试样的称量
          粉碎机            用于固体样品的粉碎。
      振荡器/涡旋仪           用于样品试液的震荡混匀。
         离心机            用于试样中物质的分离。
      水浴锅/氮吹仪       用于样品的提取,起挥干浓缩作用
      恒温培养箱          实验测定中的恒温孵育过程
      微量移液器用于实验测定过程中,试剂的移取。(单道 10μL~100μL、100μL~1000μL;多道300μL)
        酶标仪  用于试样和标准溶液中黄曲霉毒素B1的测定。
黄曲霉毒素B1 ELISA检测试剂盒  配合酶标仪使用,快速检测黄曲霉毒素B1


二、高效液相色谱法(HPLC)

(1)适用范围:

适用于大米、玉米、花生、杏仁、核桃、松子等食品中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2的测定。

(2)适用原理:

试样经乙腈-水提取,提取液过滤后,经装有反向离子交换吸附剂的多功能净化柱,去除脂肪、蛋白质、色素及碳水化合物等干扰物质。净化液中的黄曲霉毒素以三氟乙酸衍生,用带有荧光检测器的液相色谱系统分析,外标法定量。

(3)实验仪器配置:


仪器用途
粉碎机样品制备阶段,用于固体样品的粉碎
天平样品的提取过程和试剂的准备过程中,用于样品和试剂的称量
电动振荡器用于试样的提取过程,加快试样的提取。
多功能净化柱用于试样的净化
真空吹干机加快样品的浓缩,主要用于试样衍生化阶段,可被水浴氮吹仪替代
干燥箱用于试样的衍生化过程,提供衍生环境
离心机样品分离,用于试样的衍生化过程
漩涡混合器样品的混匀,用于试样的衍生化过程
移液器试剂的移取,用于标准品的制备和试样的衍生化过程
高效液相色谱系统附荧光检测器,用于样品和标准品的测定
低温冰箱用于标准储备液、标准工作液的低温储存
纯水机/超纯水机提供实验室用水

 

三、薄层色谱法(TCL)

(1)适用范围:

粮食、花生及其制品、薯类、豆类、发酵食品及酒类等各种食品中黄曲霉毒素B1 的测定。

(2)适用原理:

试样经提取、浓缩、薄层分离后,在365nm紫外光下,黄曲霉毒素B1产生蓝紫色荧光,根据其在薄层板上显示的荧光的最低检出量来定量。

(3)实验仪器配置:


仪器实验用途
小型粉碎机固体样品的制备中用于粉碎样品
样筛样品制备过程,筛选目标大小的物质
天平用于样品和试剂的称量
振荡器用于样品试液的提取,加快提取速率
水浴锅恒温加热,其干燥浓缩作用,用于样品的提取
通风柜为水浴浓缩过程提供通风环境(可不使用)
全玻璃浓缩蒸馏器用于样品的提取,起干燥浓缩作用
玻璃板(5cm×20cm)用于薄层板的制备
薄层板涂布器用于薄层板的制备
展开槽用于实验中样品的展开
紫外光灯100~125W,带有波长365nm滤光片。用于实验中样品的观察
微量注射器(或血色素吸管)用于实验测定中样品的移取(50ul) 





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