为了确保注射用药的质量和安全，尤其是静脉注射用药，热原检测技术显得越来越重要。各国药典也相继收载多种热原检测方法，包括家兔热原检查法、细菌内毒素检查法和单核细胞激活实验。家兔法被认为是检测热原的黄金标准，但存在不能定量、灵敏度低、结果重复性差、费用较高、使用活体动物等缺点，且该方法不适用于放射性药物、化疗药物、免疫抑制剂等影响家兔发热药物的热原检测，细菌内毒素检查法虽能半定量或定量检测细菌内毒素含量，灵敏度较高，但只能检测革兰阴性菌来源的细菌内毒素，不能检测其他来源的热原目前，《英国药典》《欧洲药典》，均已收录了单核细胞激活实验，用于热原检测。检测具体方法如下：
一、实验准备
细菌内毒素标准品、酵母多糖、脂壁酸、ＩＭＤＭ培养液、胎牛血清、ELISA试剂盒、流感疫苗等各供检测用疫苗样本
酶标仪、CO2培养箱、倒置三目显微镜、水浴锅、低温高速水平离心机、移液器
二、实验步骤
1、细菌内毒素、酵母多糖、脂壁酸溶液的配制
2、HL-60细胞用含20%胎牛血清的IMDM细胞培养液于37℃,5%CO2条件下培养，控制细胞浓度为1ml含1.0*105-1.0*106个细胞。
3、取生长良好的的细胞，1000r/min离心2min，弃上清液，用细胞培养液调整细胞浓度为5.0*106个/ml，接种于24孔板中，每孔400μl。再加入不同浓度热原标准品或供试液，每孔100μl，阴性对照组加入100μl细胞培养液，于37℃,5%CO2条件下培养48h后，离心（2000r/min，5min），取上清液。用 IL-6 ELISA试剂盒测上清中IL-6的量，记录实验结果。
4、采用计算机程序或四参数回归计算法进行处理，以标准品浓度为横坐标，以IL- 6测得的吸光度(A)值为纵坐标，得出四参数方程，将样品测得的IL-6的A值代入参数方程，得到样品溶液中热原含量若样品溶液热原含量乘以其稀释倍数后，小于规定的内毒素限值，判定制品符合规定若大于或等于规定的内毒素限值，判定制品不符合规定。
三、实验结论
通过与药典规定的细菌内毒素检测方法相比，结果一致。该方法作为家兔法和细菌内毒素法两种经典热原检测方法的补充方法，不仅检测热原的种类多，而且该方法灵敏度高，可以对热原进行定量检测，但该方法仍存在检测成本较高，对细胞的要求较高等不足之处。