无菌技术的概念:
无菌操作泛指在培养微生物的操作中,所有防止杂菌污染的方法。是成功地培养微生物的关键
无菌技术包括:
(1)对实验操作空间、操作者的衣着和手进行 清洁和消毒
(2)将培养器皿、接种工具和培养基等器具进行灭菌
(3)为避免周围微生物污染,实验操作应在酒精灯火焰附近旁进行
(4)避免已灭菌处理的材料用具与周围物品相接触
消毒与灭菌的概念及两者的区别
(1)消毒定义:指使用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物(不包括芽孢和孢子)
煮沸消毒法:100℃煮沸5-6min
巴氏消毒法:70-75℃下煮30min或80℃下煮15min
化学药剂消毒法:用75%酒精、新洁尔灭等进行皮肤消毒,氯气消毒水源
紫外线消毒..
(2)灭菌定义:使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物,包括芽孢和孢子,而达到完全无菌的过程
灭菌消毒技术是微生物有关工作中最普通也是最重要的技术
灼烧灭菌:接种环、接种针、试管口
干热灭菌:160-170℃下加热1-2小时,有些玻璃器皿也可采用高温干热灭菌,为了防止杂菌,特别是空气中的杂菌污染,试管及玻璃烧瓶都需采用适宜的塞子塞口,通常采用棉花塞,也可采用各种金属、塑料及硅胶帽,它们只可让空气通过,而空气中的其他微生物不能通过
高压蒸汽灭菌:100kpa、121℃下维持15-30min,是最常用的灭菌方法,可以杀灭所有的微生物,包括最耐热的某些微生物的休眠体。同时可以基本保持培养基的营养成分不被破坏
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