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1.无菌、无毒的环境:对培养液和所有培养用具进行无菌处理,通常还要在培养液中加入一定量的的抗生素,以防被污染。此外应定期更换培养液,以便清除代谢产物防止细胞代谢产物累积对细胞自身产生危害。
2.营养物质:无机物(无机盐、微量元素等),有机物(糖、氨基酸、促生长因子等)
3.血清和血浆 (提供细胞生长必须的营养成份)
4.温度和pH(36.5±0.5℃,7.2~7.4)
5.气体环境(95%的空气+5%CO2的混合气体)
其中5%CO2气体是为保持培养液的pH稳定