正蜂蜜中的主要成分是葡萄糖和果糖。蜂蜜称为天然性食品就是因为蜂蜜中含有大量的淀粉酶,它有帮助人们消化吸收的作用。因此,淀粉酶值的高低是反映蜂蜜质量的重要指标,也是出口蜂蜜检验的常检项目。蜂蜜中淀粉酶值的常规测定采用分光光度法。
一、实验原理：
将淀粉溶液加入蜂蜜样品溶液中，部分淀粉被蜂蜜中所含的淀粉酶水解后，剩余的淀粉与加入的碘反应而产生蓝紫色，随着反应的进行，其蓝紫色反应逐渐消失。用分光光度计于660nm波长处测定其达到特定吸光度所反应的时间。换算出1g蜂蜜在1h内水解1％淀粉的毫升数。
二、实验需要的仪器设备（来宝商城为您提供）
1、电子天平：精度为1mg。
2、恒温水浴锅。
3、分光光度计：实验设定波长660nm。
三、实验操作步骤：
1、淀粉溶液的标定：
吸取 5.0 mL淀粉溶液和10.0 mL水并分别置于40 ℃水浴中 15 min。 将淀粉溶液倒人10.0 mL 水中并充分混合后，取 1.0 m L加到10.0 mL 的碘溶液中，混匀，用一定体积的水稀释后，以水为空白对照，用分光光度计于660 nm 波长处测定吸光度，确定产生0.760 士0.02 吸光度所需稀释水的体积数，并以此体积数作为样品溶液的稀释系数。当淀粉来源改变时，应重新进行标定。
2、测定
（1） 样品处理:称取 5 g 混合均匀的试样，精确到0.01 g 。置于 20 mL烧杯中，加人 15 m L 水和2.5 mL乙酸盐缓冲液（pH5.3）后，移人含有1.5 mL氯化钠溶液(0.5mol/L) 的25 m L 容量瓶中并定容。
（2） 吸取 5. 0 mL淀粉溶液、10.0 m L 样品溶液（1）和 10.0 mL 碘溶液，分别置于40 ℃水浴中15 m in。 将淀粉溶液倒人样品溶液中并以前后倾斜的方式充分混合后开始计时。
（3） 5 min 时取 1.0 m L 样品混合溶液（2）加人 10.0 m L 的碘溶液中，再用淀粉溶液标定时确定的稀释水的体积数进行稀释并用前后倾斜的方式充分混匀后，以水为空白对照，用分光光度计于660 nm 波长处测定吸光度。
（4）如吸光度大于 0.235 (特定吸光度) ，应继续按（3）步骤重复操作，直至吸光度小于0.235为止 。
（5） 待测期间，样品混合溶液、碘溶液和水应保存在 40 ℃水浴中。
3、计算.
在对数坐标纸上，以吸光度(% )为纵坐标，时间(min) 为横坐标，将所测的吸光度与其相对应的时间在对数坐标纸上标出，连接各点划一直线。从直线上查出样品溶液的吸光度与 0.235 交叉点上的相对应时间，结果按式(l 计算:
X=300/t......................(1)
式中 :
X— 样品溶液中的淀粉酶值，单位为毫升每克小时[mL./(g.h)] ;
t—相对应时间，单位为分(min)。
计算结果表示到小数点后一位。
