乙酸苄酯是茶香精中香料的主要成分,是一种重要的合成香料。采用气相色谱法检测饮料中乙酸苄酯的原理是:茶饮料中乙酸苄酯经提取定容后,在色谱柱中与内标物正十二烷及其他组分分离,用氢火焰离子化检测器检测,内标法定量。
一、实验仪器设备:
1、分析天平:感量0.01g和0.1mg。
2、氮吹仪。
3、气相色谱仪:带有氢火焰离子化检测器。
4、进样器:微量注射器,5uL.
5、125 mL 分液漏斗,5mL 具塞比色试管,50mL刻度试管。
二、实验操作步骤:
1、样品提取:
准确称取40g(精确至0.01g)茶饮料于125mL 分液漏斗中,加入20mL 二氯甲烷,振摇1min ,静置分层,二氯甲烷层直接缓慢滴入漏斗(底部少许脱脂棉,上面10g无水硫酸钠)脱水过滤,收集于50mL刻度试管,然后再向分液漏斗中加入20mL二氯甲烷,振摇1min ,静置分层,同上过滤收集,之后用少量二氯甲烷冲洗漏斗三遍。收集液用氮吹仪(30℃)浓缩至3mL左右,用少量二氯甲烷将其完全转移至5mL 比色管中,准确加入1 mL 的200 ug/mL 正十二烷,混匀待测。
2、色谱参考条件:
(1)色谱分离柱:SE-30柱(聚甲氧基硅氧烷),长30m ,内径0.53mm,膜厚1.0 um。
(2)柱温:初始温度90℃,恒温1min ,程序升温,升温速率10℃/min ,最终温度为180℃,保持3min 。
(3)检测器温度:250 ℃ 。
(4)汽化室温度:230 ℃ 。
(5)氮气压力:41.4 KPa(6.0psi)
(6)氢气流速:45mL/ min。
(7)空气流速:450mL/min 。
(8)进样量:1 uL。
3、校正因子配制及计算:
(1)混标配制:五个5mL比色管中分别加入0.80,6.40,12.80,80.0,160.0 ug/mL 乙酸苄酯使用液 4mL和200ug/mL正十二烷1mL,混匀,测定。
(2)标准曲线的计算:以 乙酸苄酯对正十二烷的质量比为横坐标,以 乙酸苄酯对正十二烷的面积比为纵坐标,做标准曲线,按式(1)计算响应因子R。
4、结果计算。
乙酸苄酯含量按式(2)进行计算。