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保健食品中前花青素的测定

2016/9/17 11:18:21      来宝商城

 

前花青素(简称OPCs)是自然界广泛存在的聚多酚类混合物,主要由儿茶素的单体、二聚体至十聚体组合而成。具有高效去除人体自由基和抗氧化等作用,在心脏病、动脉粥样硬化、静脉炎、关节炎、过敏、癌症和老年性痴呆方面有独特治疗作用。其特点是高效、低毒和高生物利用率。目前在保健食品领域得到了广泛应用。

 

GB/T 22244-2008 保健食品中前花青素的测定规定了保健食品中前花青素的测定方法,适用于以葡萄籽、葡萄皮、沙棘、玫瑰果、蓝浆果、法国松树皮提取物等为主要原料制造的保健食品中前花青素的测定。

 

一、实验原理:

前花青素易溶于水,是黄烷-3-苯儿茶酚和表儿茶酚精连接而成的。依据试样中前花青素单体或聚合物在加热的酸性条件和铁盐催化作用下,C-C键断裂而生成深红色花青素离子即氰定的原理,使用高效液相色谱,经C18反相柱分离,在波长525nm处检测,根据保留时间定性,外标法定量,测定试样中前花青素含量。

 

二、仪器和设备:

 

(1)高效液相色谱仪:配有紫外检测器。

(2)超声波清洗器。

(3)离心机:4000r/min

 

三、分析步骤:

 

(一)试样处理:

 

?片剂:取20片试样,研磨成粉末。

?胶囊:取20粒胶囊内容物,混匀。

?软胶囊:挤出20粒胶囊内容物,搅拌均匀,如内容物含油,应将内容物尽可能挤完全。

④口服液:摇匀后取样。

 

(二)提取:

 

1、固体粉状试样:根据试样含量称取50mg~500mg(精确至0.001g)试样于50mL棕色容量瓶中,加入30mL甲醇,超声处理20min,放冷至室温后,加甲醇至刻度,摇匀,离心(3000r/min,10min)或放置至澄清后取上清液备用。

2、含油试样:根据试样含量称取50mg~500mg(精确至0.001g)试样置于小烧杯中,用5mL二氯甲烷使试样溶解,并倒入50mL容量瓶中,再用甲醇多次洗烧杯,并倒入50mL棕色容量瓶中,用甲醇定容至刻度,摇匀。

3、口服液:根据试样含量准确吸取1mL~5mL样液,置于50mL容量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀。

 

(三)水解反应:

 

将正丁醇与盐酸按照95:5的体积比混合后,取出15mL置于具塞锥形瓶中,再加入0.5mL硫酸铁铵溶液和2mL试样溶液,混匀,置沸水浴回流,精确加热40min后,立即置冰水中冷却,经0.45μm滤膜过滤,待进高效液相色谱分析。

 

(四)标准曲线制备:

 

吸取标准溶液(1.00mg/mL)0.10、0.25、0.50、1.0、1.5mL置于10mL棕色容量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀。各取2mL测定,处理方法同(三),以峰高或峰面积对浓度作标准曲线。

 

(五)液相色谱参考条件:

 

(1)色谱柱:耐低pH值的ODS C18柱,4.5mm×150mm5μm。

(2)柱温:35℃。

(3)检测器:紫外检测器。

(4)检测波长:525nm。

(5)流动相:水+甲醇+异丙醇+甲酸=73+13+6+8

(6)进样量:10μL。

(7)流速:1.0mL/min。

(8)色谱分析:取标准溶液及试样溶液注入色谱仪中,以保留时间定性,以试样峰高或峰面积与标准比较定量。

 

(六)注意事项:

 

实验过程中应避免阳光直射。

 

四、结果计算:

 

试样中前花青素的含量按式(1)进行计算。

  保健品中前花青素检测公式.png

式中:

 

X—试样中前花青素的含量;单位为g/kg或g/L;

X1—从标准曲线上得到的含量,单位为mg/mL;

V—试样定容体积,单位为mL。

f—稀释倍数;

m—试样的质量(或体积),单位为g或mL。

 

计算结果保留三位有效数字。

标签:保健品检测保健品中前花青素的检测      阅读量:631
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