根据《中国药典》规定，中药注射剂需进行无菌检测以保证使用安全。无菌检查应在无菌条件下进行，试验环境必须达到无菌检査的要求，检验全过程应严格遵守无菌操作。
一、 无菌检测的基本步骤
1、实验准备
2、消毒剂配制
3、环境微生物的采集
4、检验方法的确认
5、检验过程
6、结果观察与判断
二、分步简介
1、实验准备
培养基的准备--在准备室配制，配制完的培养基需经过灭菌（高压蒸汽灭菌器，一般在灭菌室进行），再经过无菌检验合格后方可使用；
实验器材、耗材的准备—
a、无菌衣、平皿、消毒剂配制缸、脱脂棉花球、纯化水、剪刀、镊子等。（使用前均应经过灭菌，根据具体性质采用不同的灭菌方法。）
b、一次性使用集菌过滤器、一次性注射器、手套、口罩、环境微生物采集器材。（实验前均应放在洁净室，用时直接取用。）
C、稀释剂、冲洗剂。（为配制灭菌后的成品。）
d、消毒剂、灯用酒精。
实验设备：生物安全柜、超净工作台、高压蒸汽灭菌器、集菌仪、薄膜过滤器、细菌培养箱、浮游生物采样器
2、消毒剂的配制
一类、二类消毒剂针对于不需要使用的无菌器具，可以在普通实验室用纯水直接稀释消毒剂的浓溶液后方可使用。
三类消毒剂是针对于需要使用的无菌器具，需要在无菌室内配制。首先使用一次性集菌过滤器一个，将排液口放置在灭菌过的锥形瓶上，将消毒剂经过薄膜过滤器除菌，然后按比例稀释。
3、环境微生物的采集
a、人体表面微生物样本的采集
b、物品表面微生物样本的采集（集菌过滤器）
c、空气中微生物样本的采集（浮游微生物采样器）
d、消毒剂中携带的微生物样本采集（需通过薄膜过滤器后取样）
所采集样本均应在实验结束后，置细菌培养箱中培养48h后观察。
4、检验方法的确认
进行产品无菌检查时，应进行方法适用性试验，以确认所采用的方法适合于该产品的无菌检查。
菌种及菌液制备 除大肠埃希菌外，金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、生孢梭菌、白色念珠菌、黑曲霉的菌株及菌液制备同培养基灵敏度检查。大肠埃希菌的菌液制备同金黄色葡萄球菌。
薄膜过滤法取每种培养基规定接种的供试品总量按薄膜过滤法过滤，冲洗，在最后一次的冲洗液中加入小于lOOcfu的试验菌，过滤。加硫乙醇酸盐流体培养基或胰酪大豆胨液体培养基至滤筒内。另取一装有同体积培养基的容器 ，加入等量试验菌，作为对照。置规定温度培养，培养时间不得超过5天，各试验菌同法操作。
直接接种法取符合直接接种法培养基用量要求的硫乙酵酸盐流体培养基6 管，分别接入小于lOOcfu的金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、生孢梭菌各2 管，取符合直接接种法培养基用量要求的胰酪大豆胨液体培养基6 管，分别接入小于 lOOcfu的枯草芽孢杆菌、白色念珠菌、黑曲霉各2管。其中1管接人每支培养基规定的供试品接种量，另 1 管作为对照，置规定的温度培养，培养时间不得超过5 天。
结果判断与对照组比较,如含供试品各容器中的试验菌均生长良好，则说明供试品的该检验量在该检验条件下无抑菌作用或其抑菌作用可以忽略不计，照此检査方法和检查条件进行供试品的无菌检查。
5、无菌检测
薄膜过滤法一般应在无菌室操作，采用封闭式薄膜过滤器。无菌检査用的滤膜孔径应不大于0.45pm，直径约为50mm。根据供试品及其溶剂的特性选择滤膜材质。使用时，应保证滤膜在过滤前后的完整性。
供试品取规定量，直接过滤，或混合至含不少于 100ml适宜稀释液的无菌容器中，混匀，立即过滤。样品冲洗后，1份滤器中加人100ml硫乙醇酸盐流体培养基，1份滤器中加入100ml胰酪大豆胨液体培养基。
培养观察—在培养室进行，将上述接种供试品后的培养基容器分别按各培养基规定的温度培养14天。培养期间应逐日观察并记录是否有菌生长。如在加人供试品后或在培养过程中，培养基出现浑浊，培养14天后，不能从外观上判断有无微生物生长，可取该培养液适量转种至同种新鲜培养基中，培养 3天 ，观察接种的同种新鲜培养基是否再出现浑浊；或取培养液涂片，染色，镜检，判断是否有菌。
6、结果观察与判断
阳性对照管应生长良好，阴性对照管不得有菌生长。否则，试验无效。