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抗人T细胞免疫球蛋白效价测定

2016/7/9 14:06:46      来宝商城

抗人T细胞免疫球蛋白是由人T淋巴细胞免疫家兔后,取其血清或血浆经去除杂抗体、纯化、浓缩后,再经病毒灭活处理并加入适量的稳定剂冻干制成。抗人T细胞免疫球蛋白的效价检测对其质量控制具有很重要的作用。

一、检测方法:淋巴细胞毒试验

二、检测原理:本法是依据抗人T细胞免疫球蛋白与人淋巴细胞E受体结合后,可阻止绵羊红细胞与淋巴细胞E受体特异性结合,根据其结合抑制率测定供试品抗人T淋巴细胞免疫球蛋白效价

三、试剂:淋巴细胞分离液、Hank's液、20%胎牛血清Hank's液、淋巴细胞悬液、补体(采取正常家兔血清)、0.5%台盼蓝生理氯化钠溶液、2.5%戊二醛溶液

四:供试品溶液的制备、阳性对照溶液的制备、阴性对照溶液制备

五、实验步骤:1、取 供 试 品 溶 液 0.05ml,加 淋 巴 细 胞 悬 液0.0 5 m l , 37°C1 小 时 2、加 1 : 5 稀 释 的 家 兔 血 清0.05ml,37°C3 0 分 钟 3、 加 0.5% 台盼蓝生理氯化钠
溶 液 0.05ml,置 37°C5 分 钟 ,立即 镜检 计数 淋 巴 细 胞 ,计算死亡细胞率,一 般 数 100个淋巴细胞。4、取阳性对照溶0.05ml,加 淋 巴 细 胞 悬 液 0.05ml, 自 37°C1 起 , 同 法 操 作 ,作 阳 性 对 照 。6、取 阴 性 对 照 溶 液0.05ml,加 淋 巴 细 胞 悬 液 0. 05ml, 自 37°C1 小 时 起 ,同法操作,作阴性对照

六、设备使用

产品名称产品的作用
超净工作台为效价检测提供无菌无尘的环境
高压蒸汽灭菌器
用于检测器具、试剂、稀释剂的灭菌
低温冰箱
用于淋巴细胞分离液制备过程中冷丙酮的存放
离心机利用离心力,分离各组分
恒温水浴锅试验中进行恒温加热
血球计数板计算淋巴细胞数量
显微镜
镜检时观察微生物的数量
纯水机和超纯水机用于效价检测试剂的稀释配制


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