实验前准备：
试剂盒和待检验的样本置室温平衡30分钟。
将浓缩洗涤液用蒸馏水或去离子水按1:24稀释成工作洗涤液。
实验步骤：
1、每次实验均设立空白对照孔，阴性对照，cutoff对照和阳性对照各2孔，每孔各加入100ul相对应的对照品。
2、将100ul样品稀释液加入剩余的个反应孔中（空白对照孔除外）。
3、将5ul待测样品加入到加有样品稀释液的反应孔中，混匀。空白对照孔不加样品。
4、覆盖封口胶纸，置37℃孵育30min.
5、取出已孵育完毕的孔板，弃去封口胶纸。
6、洗板5次，拍干（手工洗板：弃去孔内液体、洗涤液注满各孔，静置30s,甩干，重复5次后拍干）
7、每孔加入酶结合物100ul（空白对照孔除外）
8、覆盖封口胶纸、置37℃孵育30min。
9、取出已孵育完毕的反应板，弃去封口胶纸、洗板5次、拍干。
10、每孔加50ul显色剂A液后再加50ul显色剂B液，轻轻振荡混匀。
11、覆盖封口胶纸，置37℃孵育10分钟。
12、每孔加终止液50ul。
13、30min内用酶标仪读书，取波长450nm（建议采用双波长的酶标仪比色，参考波长630nm）,先用空白对照孔教零。然后测定各孔OD值。
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