青霉素的效价检测对其质量控制具有重要作用,可以使用的方法有液体稀释法、比浊法和扩散法。国际上最常用的就是管蝶扩散法。
一、原理:青霉素在琼脂平板培养基中的扩散渗透作用,比较标准品和检品对试验菌抑菌圈的大小来测定供试品的效价
二、材料和器皿:1、菌种(金黄色葡萄球菌、产黄青霉菌)2、培养基
三、试剂:青霉素标准品和供试品、无菌缓冲液、生理盐水
四、1、敏感菌悬液的制备:(1)保藏与传代(培养箱和低温冰箱)(2)、活化(3)、制备悬液(离心机)2、青霉素标准溶液的制备:(1)青霉素标准母液(2)青霉素标准工作液(天平和低温冰箱)
五、实验步骤:称量(天平)——稀释——双碟制备(超净工作台、灭菌大口吸管、电热恒温水浴锅)——放置钢管——滴加青霉素溶液(定量加样器、恒温培养箱)——抑菌圈测量(直尺或游标卡尺)
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