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通用细胞冻存液(含血清)

含血清

通用细胞冻存液

产品简介:

随着实验细胞培养的发展,除了原代培养之外,人工开发出来的细胞系的保存越来越重要。冷冻保存细胞系的优点如下:1、减少基因漂移;2、减缓细胞系的衰老;3、稳定表型;4、减少微生物污染及交叉污染机会等。细胞冷冻的原理在于尽可能降低细胞内的晶体形成,减少细胞内水凝固所形成的高浓度溶质对细胞造成的低温损伤,从提高细胞复苏时的存活率。细胞冻存的数量应保证复苏时低温保护剂获得1:10~1:20的稀释,稀释后的细胞浓度仍高于正常传代的细胞浓度为宜,这是因为当低温保护剂稀释10~20倍以后,该浓度一般不会对细胞造成毒性损伤。

通用细胞冻存液主要由FBS、DMSO等组成,是非常经典的一种无菌冻存液。用于各种哺乳动物原代细胞、传代细胞系、杂交瘤细胞等的冻存。

自备材料:

1、 细胞计数器

2、 细胞冻存管

3、 低温冰箱或液氮

4、 超净工作台

操作步骤(仅供参考):

1、 培养细胞至对数生长晚期期,显微镜观察其外观、形态、有无污染等,取状态良好的细胞进行冻存操作。如为贴壁生长细胞,用胰蛋白酶消化并用完全培养基终止消化,进行细胞计数;如为悬浮生长细胞,进行细胞计数。

2、 500~1000g离心5min,弃上清。

3、 加入适量的通用细胞冻存液,重悬细胞,使细胞浓度达到1~10×106/ml,置于冻存管中,密闭、不要拧的太紧,避免弯曲变形。

4、 一般遵循1℃/min的速率进行冷冻。亦可采用4℃20min,-20℃30min,-70℃过夜,收关置于液氮罐中长期存储。

注意事项:

1、 注意在超净工作台内无菌操作,尽量避免污染。

2、 初次使用融化后可在4℃保存1个月,但应减少反复冻融的次数,以免失效。

3、 杂交瘤细胞冻存时应定期复苏,检查细胞的活性和分泌抗体的稳定性。

4、 为了您的安全和健康,请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。

5、 本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。


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