6-苄基腺嘌呤是一种人工合成的细胞分裂素，是使用非常广泛的生长调节剂6-BA作为植物促长剂和果蔬保鲜剂的主要成分，已在国内外进入应用阶段。据报道，市场上豆芽中6- BA 添加超标现象严重人体摄入过量的6- BA 会刺激皮肤黏膜，伤害食道和胃黏膜，出现恶心、呕吐等现象，而相关的定量检测方法有常规的紫外分光光度法，液相色谱法、液相色谱-质谱法等。本文笔者建立了超高效液相色谱 －质谱联用法检测豆芽中6- BA 的方法，分离时间大大缩短，溶剂消耗量也减小到最低用量，并且具有更高的灵敏度和分离度，对豆芽样品中6- BA的检测提供了有力的技术支持。
1、 实验准备
样品：豆芽（市购）
设备：超高效液相色谱质谱联用仪、移液器、组织捣碎机、均质机、薄膜过滤器、高速离心机、湘智离心机、
试剂：标准品、甲醇、乙腈、甲酸、乙酸、超纯水、酸化甲醇、
色谱条件：流动相A为0.1%甲酸水溶液，B为0.1%甲酸乙腈。
色谱柱： WATEＲS ACQUITY C18 ( 50 mm×2.1 mm，1.7m) ;进样量: 10 l;柱温: 40℃。
质谱条件：略
2、 实验流程
（1） 样品前处理
试样经组织捣碎机捣碎混匀后备用，取5 g样品(精确至0．01 g) 于50 ml聚丙烯离心管中，加入10ml酸化甲醇，用均质机均质3 min， 10000 r /min 离心10 min，上清液转入50 ml容量瓶中，样品再用20 ml酸化甲醇重复提取2次合并上清液， 用水定容至刻度， 摇匀， 吸取2ml于10ml容量瓶中， 用50%甲醇水溶液定容至刻度， 摇匀， 经0.2m滤膜过滤，供 UPLC- MS /MS 分析。
（2）方法学试验
a、线性关系：取样品按照色谱、质谱方法进样，记录MRM图，得峰面积。得到线性回归方程和相关系数。
b、检出限与定量限：取样品按照色谱、质谱方法进样，记录MRM图中定量离子的信噪比，以3倍信噪比计算得出检出限，10倍信噪比计算得出定量限。
c、回收率与精密度测定：平行称取未添加6-BA的豆芽匀浆液，加入标准品进样，计算 每个浓度下的回收率、同时计算相对标准偏差。
（3）结果分析
（4）实际样品检测
采用所建立的分析方法对市场上随机抽查的绿豆芽、黄豆芽等豆芽类样品共10批次进行6-BA残留量的定性定量分析、结果表明，被测的10批次样品中，均未检出6- BA。
3、 结论
该研究建立了豆芽中6-BA的超高效液相色谱－质谱联用的检测方法。通过线性关系、检 出限与定量限、空白基质中3个浓度的加标回收率和精密度试验等方法学考查，得出该法结果满意，完全符合方法学要求、方法简便、快速、稳定、重现性好，便于推广使用， 对于豆芽中6-BA的残留监控提供了有力的技术支撑。
资料来源：《超高效液相色谱 －质谱法测定豆芽中 6-苄基腺嘌呤的方法研究》