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酶联免疫/ELISA分类

2016/6/3 12:03:32      来宝商城

    ELISA又称为酶联免疫吸附试验,主要用于乙肝五项、HIV、激素、优生优育系列的检测。用于临床检验的ELISA主要有以下几种类型:

一、双抗加心法

双抗体夹心法检测抗原

双抗体夹心.png

    将特异性抗体与固相载体结合,形成固相抗体。加入待测样本反应,标本中的抗原与固相抗体反应形成抗原抗体复合物。加入酶标抗体,与固相免疫复合物结合,加显色液,固相载体上的酶催化底物成为有色产物,酶标仪染色。

2、双抗原夹心法检测抗体

              双抗原夹心.png

    反应模式与双抗体夹心法类似。用特异性抗原进行包被和制备酶结合物,以检测相应抗体。与间接法测抗体的不同之处为以酶标抗原代替酶标抗体。

二、间接法(以鸭病毒性肝炎为例)

间接法.png

    加抗原包被(4摄氏度过夜、洗涤三次、晾干),加入检测血清(37摄氏度孵育2小时、洗涤三次、晾干),加酶标抗体(37摄氏度孵育30分钟),加终止液放入酶标仪中进行检测。

三、竞争性ELISA

              竞争法ELISA.jpg

    标本中的抗原和一定量的酶标抗原竞争与固相抗原结合,再加底物染色。标本中的抗原越多,结合在固相上的酶标抗体越少,因此阳性反应呈色浅于阴性反应。

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