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WERI-RB-1 人视网膜神经胶质瘤细胞

WERI-RB-1 人视网膜神经胶质瘤细胞
  • 分类:
    • 细胞系
  • 种属:
    • 人源
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细胞介绍 WERI-Rb-I细胞株是1974年R.M. McFall 和 T.W. Sery建立的两株人眼癌细胞系中的一株。 细胞能在Difco Bacto-Agar中存活但不形成克隆。 扫描电镜显示在表面囊泡,板状伪足和微绒毛在数量上和频率上的改变。 细胞分化研究,肿瘤治疗的动物模型和生化评价都涉及这株细胞。   细胞特性 1) 来源:视网膜 2) 形态:圆形细胞聚集成葡萄状,悬浮生长 3) 含量:>1x106 4) 污染:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性 5) 规格:T25瓶或者1mL冻存管包装   运输和保存 1)使用含有优质胎牛血清的2ml冻存管发送存活细胞。 2)收到细胞后,可在1000RPM,常温条件下,离心5min后,于洁净操作台弃去上清,加入推荐使用的培养基后转移至T25培养瓶中培养,传代达到细胞生长状态良好时,再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。 3) 收到细胞后请拍照,3天内如果发现污染,请及时拍照与我们联系。 细胞用途: 仅供科研使用。   细胞接收后的处理: 1) 收到细胞后,请检查是否漏液,如果漏液,请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长状态,酒精消毒瓶壁并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 将T25瓶中的细胞培养基离心后,去上清,添加6ml完全培养基,加入新的T25瓶中继续培养。 4) 如果细胞长满80%请及时进行细胞传代. 5)  接到细胞次日,请检查细胞是否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。 细胞培养步骤 一.培养基及培养冻存条件准备: 1) 准备RPMI-1640培养基;优质胎牛血清,10%;双抗,1%。 2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。 3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。 二. 细胞处理: 1) 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,离心管加入4mL培养基混合均匀。在800-1000RPM条件下离心4-5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入T25培养瓶中培养,补加培养基至6ml。 2) 细胞传代:如果细胞密度达80%,即可进行传代培养。 注:第一次传代推荐传代比例为1:2,以后传代比例可根据客户需要自己决定。 3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。 下面T25瓶为类; 1,细胞冻存时,取上清,可使用血球计数板计数。 2,4min ,1000rpm 离心去掉上清。加1ml血清重悬细胞,根据细胞数量加入血清和DMSO,轻轻混匀,DMSO终浓度为10%,细胞密度1-2xE6/ml,每支冻存管冻存1ml细胞悬液,注意冻存管做好标识。 3,将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
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